HPLC法测定不同产地元胡药材中5种生物碱含量

目的: 建立同时测定元胡药材中延胡索乙素、紫堇碱、原阿片碱、四氢小檗碱和脱氢海罂粟碱5种生物碱含量的高效液相色谱法,并对不同产地元胡药材进行测定。方法: 采用超声辅助法提取样品,外标法定量,结合3D指纹图谱进行定性鉴别。色谱条件:采用Poroshell 120 EC-C₁₈(4.6 mm×150 mm,2.7 μm)色谱柱,以0.1%乙酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~20 min,20%A→25%A;20~55 min,25%A→45%A;55~65 min,45%A→55%A),流速1 mL·min^-1,柱温30℃,检测波长280 nm。结果: 原阿片碱、延胡索乙素和紫堇碱质量浓度在5~50 μg·μL^-1之间,四氢小檗碱和脱氢还罂粟碱质量浓度在1.08~10.8 μg·μL^-1之间线性关系良好(r>0.999)。浙江仙居、浙江东阳、浙江磐安、汉中城固、河南辉县、广西河池、山东泰安、黑龙江绥化、吉林通化、辽宁清原、湖北郧西、湖南新化、安徽亳州13个产地元胡药材样品中延胡索乙素、紫堇碱、原阿片碱、四氢小檗碱和脱氢海罂粟碱5种生物碱含量有一定差异,但生物碱比例却有一定相似性,原阿片碱含量均在11%~19%,延胡索乙素含量均在22%~37%,紫堇碱含量均在27%~37%,四氢小檗碱含量均在15%~29%,脱氢还罂粟碱含量均在1.2%~2.0%。浙江仙居道地药材中5种生物碱的含量均居首位,有着天然的含量优势;汉中城固元胡中5种生物碱含量与浙江3个产地含量均值接近甚至超过,与汉中元胡由浙江引种而来的事实也是相符的。结论: 本法经方法学验证可以作为元胡药材质量评价的方法。不同来源样品检测结果说明,延胡索乙素、紫堇碱、原阿片碱、四氢小檗碱和脱氢海罂粟碱5种成分含量及指纹图谱的差异与药材品种及产地有相关性,可为道地药材元胡的产地溯源系统的建立提供参考。

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