3种不同基原甘草中18α-甘草酸与18β-甘草酸的含量分析

目的: 建立同时测定甘草中2 种三萜类活性成分——18α-甘草酸与18β-甘草酸含量的HPLC分析方法,并对中国药典规定的3 种不同基原甘草样品中18α-甘草酸与18β-甘草酸的含量进行分析比较。方法: 以同一产地的3 种不同基原2 年生甘草作为实验样品;HPLC 法对样品中的18α-甘草酸与18β-甘草酸进行测定。色谱柱:Agela Durashell C₁₈-AM (250 mm×4.6 mm,5 μm);流速:0.8 mL·min^-1;流动相:10 mmol·L^-1 高氯酸铵水溶液 (用氨水调节pH 为8.2)-甲醇 (48:52);检测波长:250 nm;柱温:50 ℃。结果: 在选择的色谱条件下,18α-甘草酸和18β-甘草酸达到了较好的分离;线性范围分别为0.010 70~0.214 0 μg 和0.216 4~4.328 μg;检测限分别为3.210 ng 和4.330 ng;定量限分别为11.26 ng和12.65 ng;平均回收率 (n=3)分别为99.2%~100.1% (RSD ≤ 0.93%)和99.8%~99.9% (RSD ≤ 0.72%)。在3 种基原的甘草样品中,光果甘草的18α-甘草酸与18β-甘草酸含量最高,分别为 (2.650±0.06421) mg·g^-1 和 (37.182±0.844 3) mg·g^-1 (n=25);乌拉尔甘草的含量次之,分别为(1.975±0.057 12) mg·g^-1 和 (29.413±0.741 2) mg·g^-1 (n=25);胀果甘草的含量最低,分别为(1.604±0.043 72) mg·g^-1 和(17.810±0.502 1) mg·g^-1 (n=25)。18α-甘草酸和18β-甘草酸的含量存在显著相关关系。结论: 经方法学验证,本文方法可用于不同基原甘草中18α-甘草酸与18β-甘草酸的含量分析,并为以18α-甘草酸为目标的优质甘草筛选及定向育种奠定基础。