HPLC同时测定不同产地马尾松和不同种属松叶中槲皮素、山柰酚的含量

目的: 建立松叶中槲皮素、山柰酚的HPLC含量测定方法,为松叶药材质量标准的建立提供参考.同时对不同产地、不同种属松叶进行比较研究. 方法: 采用高效液相色谱法,使用Agilent ZORBAX SB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以0.5%磷酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~9 min,25%B→30%B;9~19 min,30%B;19~20 min,30%B→25%B;20~40 min,25%B),流速0.8 mL·min^-1,检测波长380 nm,柱温30 ℃.通过优化参数(脱色、脱色溶剂、甲醇预提、盐酸水溶液浓度、溶剂用量、提取时间)确定槲皮素、山柰酚含量测定预处理的最佳条件,并测定不同产地马尾松及同一产地不同种属松叶中槲皮素、山柰酚的含量. 结果: 槲皮素、山柰酚的含量测定预处理方法为:石油醚(30~60 ℃)脱色,甲醇-盐酸水溶液(5.0→10)(4:1)50 mL,回流提取110 min;松叶中槲皮素进样量在0.13~2.24 μg范围内线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为98.6%(RSD=1.6%);山柰酚进样量在0.20~1.04 μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.5%(RSD=2.4%);两者方法精密度及重复性均良好.在所测的不同产地马尾松中槲皮素、山柰酚总含量为0.715%~0.371%,其中广西产马尾松最高,江苏产马尾松含量最低;在吉林产不同种属松叶中槲皮素、山柰酚的含量为0.846%~0.515%,以红松最高,樟子松最低. 结论: 本方法经过方法学考察证明可用于松叶药材中槲皮素、山柰酚的含量测定;不同产地马尾松和不同种属松叶中槲皮素、山柰酚含量有一定差异.

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