纤维蛋白原-凝血酶时间法用于水蛭质量控制方法的研究

目的：建立一种基于用血液凝固分析仪测定纤维蛋白原-凝血酶时间的水蛭生物活性测定方法(Fibg-TT法)，定义效价并建立水蛭标准品。方法：就基源为蚂蟥和日本医蛭的水蛭分别建立了反应体系，水蛭浸提液比空白对照凝固时间延长1 s作为1个效价单位(U)，定义并测得水蛭标准品效价。将高、中、低浓度的水蛭标准品和供试品的浸提液与0.5%的纤维蛋白原混合，加入凝血酶，用血凝仪测定凝固时间，结果进行对数转换后，用生物检定统计法中的量反应平行线3.3法测定供试品的效价。结果：本实验测得蚂蟥和日本医蛭标准品的效价分别为5650 U·g^-1和4130 U·g^-1，当两者浸提液的浓度分别在121.5~1130 U·mL^-1和17.3~66.1 U·mL^-1范围内时，对数凝固时间与浓度线性较好(r=0.9985；0.9965)，准确度(RSD=4.5%，n=6；RSD=3.6%，n=6)、重复性(RSD=3.8%，n=6；RSD=2.4%，n=6)和中间精密度(RSD=1.7%，n=6；RSD=2.4%，n=6)均良好，该方法测定结果可靠。结论：该方法用延长凝固时间来定义水蛭的效价，并建立水蛭标准品，具有可行性。Fibg-TT法，操作简便，人为因素影响小，客观准确，重复性和中间精密度好，能区分和量化不同批次水蛭的效价，可用于水蛭效价的测定，控制其质量。

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