基于聚类分析和主成分分析的正源方HPLC指纹图谱研究

目的:建立10批不同产地药材的正源方HPLC指纹图谱,并对其共有峰进行成分差异分析。方法:采用Inert Sustain C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以0.1%磷酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长203 nm,柱温30℃。以人参皂苷Rb1峰为参照,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2004 A版）,绘制10批正源方样品的HPLC指纹图谱,进行色谱峰匹配和相似度评价,确定共有峰,采用SPSS 20.0软件进行聚类分析和主成分分析,根据主成分分析结果并结合不同批次峰面积大小,筛选出可能影响正源方质量的药材产地。结果:建立了正源方的HPLC指纹图谱,标定出15个共有峰,并根据对照品指认5个共有峰（阿魏酸、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、重楼皂苷Ⅵ和仙鹤草内酯）;聚类分析将10批正源方样品聚为4类;经主成分分析,4个主成分因子的累积方差贡献率为91.271%,筛选出5个标志性色谱峰,其中3个鉴定为人参皂苷Rg1、重楼皂苷Ⅵ和仙鹤草内酯,将这5个标志性色谱峰再进行聚类分析与之前结果基本一致,并且10批样品主成分综合得分与标志性色谱峰的峰面积大小存在相关性。经成分差异分析,结果表明不同产地正源方质量有差异,且当归和仙鹤草的产地不同对正源方品质有较大影响。结论:所建HPLC指纹图谱及成分差异的分析结果能够较好地辨认影响正源方质量差异的标志性成分,可为正源方不同产地原药材的筛选提供科学依据。